北京供應全自動原位雜交儀廠家
發(fā)布時間：2023-10-14 01:01:48
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蛋白同位素標記是經(jīng)典的一種蛋白示蹤和蛋白組學定量技術，與體外標記技術相比，同位素標記技術屬于體內(nèi)標記。原理：用天然同位素(輕型)或穩(wěn)定同位素 (重型)標記的必需氨基酸取代細胞培養(yǎng)基中相應氨基酸，細胞經(jīng)5-6個倍增周期后，穩(wěn)定同位素標記的氨基酸全部摻入到細胞新合成的蛋白質(zhì)中替代了原有氨基酸。不同標記細胞的裂解蛋白按細胞數(shù)或蛋白量等比例混合，經(jīng)分離、純化后進行質(zhì)譜鑒定，根據(jù)一級質(zhì)譜圖中兩個同位素型肽段的面積比較進行相對定量。
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通過各種方式獲得目標抗體后，在某些情況下，為了方便對抗原進行觀察和檢測，通常會選擇利用一些易測定又具有高度敏感性的物質(zhì)作為標記物標記抗體，通過檢測這些標記物的增強放大效應而產(chǎn)生的顏色變化、光譜變化等來顯示或定量反應系統(tǒng)中抗原或抗體的性質(zhì)與含量。利用抗體的組成物氨基酸的特殊理化性質(zhì)，在特定的條件下使抗體與標記物結合，形成抗體標記物?？贵w標記主要用于抗原的定位分析，能通過標記物的增強放大效應提高檢測靈敏度，是一種快速價廉的定量測定方法。
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哺乳動物蛋白表達系統(tǒng)適用于科學家對天然構象蛋白的體外重組表達需求，如糖基化修飾，磷酸化修飾等；利用哺乳動物蛋白表達系統(tǒng)，經(jīng)過高密度發(fā)酵技術培養(yǎng)，佰泉生物的熒光原位雜交儀科學家可以做到高達6.3g/L表達水平的重組抗體發(fā)酵，適合于重組單抗藥物的高水平表達發(fā)酵。我們的細胞發(fā)酵培養(yǎng)人員均經(jīng)過嚴格的GMP體系培訓和質(zhì)量控制體系培訓，可為客戶提供可追溯的蛋白表達與制備文件記錄。對于3-10L的貼壁哺乳動物細胞發(fā)酵規(guī)模，我們可以直接利用一次性細胞發(fā)酵工廠進行細胞發(fā)酵。
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動態(tài)濁度法是指通過檢測反應混合物的濁度到達預先設定的吸光度所需要的反應時間，或是檢測濁度增加速度來檢測內(nèi)毒素的方法。在適宜的條件下（溫度，pH值及無干擾物質(zhì)），細菌內(nèi)毒素激活C因子，引起一系列酶促反應，使鱟試劑產(chǎn)生凝集反應形成凝膠。隨著凝膠的形成，反應液的吸光度(OD值，濁度)增加，OD值增加的速度與內(nèi)毒素濃度成正相關。換言之，OD值上升某一預設限值(啟動OD)所需要的時間(定義為啟動時間)與內(nèi)毒素濃度成負相關，啟動時間的對數(shù)與內(nèi)毒素濃度的對數(shù)成線性關系，據(jù)此，熒光原位雜交儀可以定量檢測供試品的內(nèi)毒素濃度。客戶也可以要求我們提供半定量方法-凝膠法進行樣品內(nèi)毒素限度水平檢測。